ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。
試劑盒種類多樣,那么你怎么在眾多試劑盒中區別真假試劑盒呢?
購買前:
1.選擇正規公司進口試劑盒盡量選擇大公司;國產試劑盒一定要選擇大型正規企業,這個反映的不僅是產品質量的問題,對供應商的售前售后服務也是一個非常嚴格的檢驗。
2.產品的文獻引用特別是高質量的SCI文章的引用是很多用戶都關心的問題,這是業界對產品認可的一個非常重要指標,而且對相關用戶的科研有一定的借鑒作用。
3. 過硬的冷鏈物流體系
目前冷鏈物流體系已經非常成熟,各家供應商一般都能保證抗體的低溫運輸。對于供應商而言,主要是舍得投入,好的抗體供應商在抗體收到后,一般冰盒還能堅持2-3天,足以讓使用者安心實驗。
4. 正規的銷售(直銷/分銷)渠道
在國內,銷售渠道是問題突出的關鍵環節,尤以假抗體試劑為甚,很多產品在包裝上其實是可以辨別的(科研工作者很少關注,往往以價格為導向)。在利益的驅使下,部分經銷商經常會自己制作抗體試劑,貼上假標簽以次充好;另一個很普遍的現象是從正規渠道購得抗體試劑,通過小作坊稀釋分裝后,再出售給科研工作者。無論是以次充好,還是稀釋分裝,都會給科研工作者都帶來很多實驗風險。
5. 不常見指標的選擇如需檢測不常見物種的樣本(如禽類、豬、羊等),可選擇靠譜的生物網站或ELISA試劑盒供應商。其實,“貨比三家”有時會有一些“驚喜”,也許你會發現:某個公司的說明書除了指標名稱不一致,其他內容基本一樣;某個指標,幾家公司試劑盒的性能參數*一樣…一定要記住:關于網上宣傳有所有種屬所有指標ELISA試劑盒的公司,那真的是再謹慎也不為過。
6. 所有指標常備現貨抗體并不十分穩定,針對非熱門研究指標,廠家為保證產品質量通常不會長期備現貨,若承諾相對冷門的ELISA試劑盒能隨時發貨,那需謹慎考慮是否要選擇該供應商。
購買后:
1.檢查檢查說明書、包裝盒的質量,通常假偽劣產品為了降低成本,印刷的質量會比較差。其次仔細閱讀說明書,查找ELISA的性能指標。
2.交叉實驗鑒別
如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。
(4) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物。
(5) 實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6) 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
3.干擾實驗鑒別
利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液
(2) 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物
(4) 實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5) 如果標準曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。